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高效液相色譜儀的系統(tǒng)組成、工作原理
高效液相色譜儀一般都具備貯液器、高壓泵、梯度洗提裝置(用雙泵)、進樣器、色譜柱、檢測器、恒溫器、記錄儀等主要部件。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較 高效液相色譜,具有高效、快速、靈敏等特點,高效液相色譜以經(jīng)典的液相色譜為基礎,是以高壓下的液體為流動相的色譜過程。高效液相色譜分析的流程如下:
高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。高壓泵將儲液器中的流動相打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,溶解于流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi),因為樣品溶液中的各組分在固定相和流動相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。遇到復雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。
高效液相色譜的分離過程 HPLC,它借溶質在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質得以分離。
與經(jīng)典的液相色譜相比,具有高效液相所用的固定相粒度?。ǎ担酰?10um)、傳質快、柱效高的優(yōu)勢。近年來,在保健食品功效成分、營養(yǎng)強化劑、維生素類、蛋白質的分離測定等應用廣泛。世界上約有80%的有機化合物可以用HPLC來分析測定。
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